Plásmido Doble Nickase (h) P2Y6: sc-402587-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)P2Y6 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa P2Y6 (h) y el plásmido de doble nickasa P2Y6 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a P2RY6. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) P2Y6 | sc-402587-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) P2Y6 | sc-402587-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
P2RY6 codifica el receptor humano P2Y6, un receptor purinérgico acoplado a proteína G que se activa principalmente por UDP extracelular para acoplarse a la señalización de Gq/11. La estimulación de P2Y6 promueve la activación de la fosfolipasa C, la movilización de Ca2+ intracelular, la señalización de PKC y respuestas transcripcionales aguas abajo vinculadas a MAPK/NF-κB, que modulan la liberación de citocinas, la fagocitosis y el transporte iónico epitelial. Este receptor participa en la señalización de la inmunidad innata y en la inflamación tisular en contextos respiratorios, vasculares y gastrointestinales, y su desregulación se ha asociado con procesos inflamatorios y fibróticos, así como con señalización del microambiente relevante para el cáncer. Como receptor de superficie que integra señales de peligro mediadas por nucleótidos, P2Y6 se estudia con frecuencia en vías que conectan la señalización purinérgica con la activación inmunitaria y la función de barrera.
P2Y6 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus P2RY6 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de P2RY6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de P2RY6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con P2RY6 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.