Plasmide Double Nickase (h) OTUD7A: sc-414831-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) OTUD7A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide OTUD7A Double Nickase (h) et le plasmide OTUD7A Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant OTUD7A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) OTUD7A | sc-414831-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) OTUD7A | sc-414831-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
OTUD7A (OTU deubiquitinase 7A) est une protéase à cystéine humaine qui retire l’ubiquitine de substrats protéiques, modulant ainsi la signalisation dépendante de l’ubiquitine et le renouvellement des protéines. En régulant la déubiquitination, OTUD7A influence des voies liées à la protéostase, au trafic endosomal/vésiculaire et à des signalisations de réponse au stress qui affectent l’homéostasie cellulaire. Des études génétiques et fonctionnelles ont associé des perturbations d’OTUD7A à des phénotypes neurodéveloppementaux, ce qui motive l’exploration de la manière dont une dynamique de l’ubiquitine altérée influence la différenciation neuronale, la fonction synaptique et la stabilité du génome. En tant que déubiquitinase, OTUD7A est également pertinente pour les recherches sur l’édition des chaînes d’ubiquitine et sur le dialogue entre l’ubiquitination et d’autres modifications post-traductionnelles.
OTUD7A Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus OTUD7A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de OTUD7A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de OTUD7A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de OTUD7A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.