Date published: 2026-7-11

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OSX双切口酶质粒(m): sc-431270-NIC

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • OSX 双切口酶质粒(m)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • OSX双切酶质粒(m)和OSX双切酶质粒(m2)编码针对Sp7的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:OSX: sc-393325,通过WB, IF或者IHC分析
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    OSX双切口酶质粒(m)

    sc-431270-NIC
    20 µg
    $410.00

    OSX双切口酶质粒(m2)

    sc-431270-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    小鼠 Sp7 编码 osterix(OSX),这是一种锌指转录因子,在 BMP 和 Wnt/β-连环蛋白信号通路的下游,对成骨细胞谱系的承诺与成熟至关重要。OSX 协调控制细胞外基质沉积与矿化的转录程序,包括调控 Bglap、Col1a1 和 Alpl 等基因。在骨发育与骨重塑过程中,Sp7 活性整合来自成骨祖细胞的信号以驱动分化,同时调节其与 RUNX2 依赖性通路的相互作用。Sp7/OSX 功能失调与骨化受损及骨骼表型异常相关,因此在骨生物学、骨折修复以及与成骨相关疾病的研究中具有重要意义。

    OSX 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Sp7 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Sp7内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Sp7的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Sp7基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。