Plasmide Double Nickase (m2) Olfr45: sc-422035-NIC-2
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m2) Olfr45 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Olfr45 Double Nickase (m2) et le plasmide Olfr45 Double Nickase (m22) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Olfr45. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m2) Olfr45 | sc-422035-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin Olfr45 code un récepteur olfactif appartenant à la superfamille des récepteurs couplés aux protéines G (RCPG), impliqué dans la reconnaissance des odorants et la transduction du signal au niveau de l’épithélium sensoriel olfactif. Lors de la liaison d’un ligand, OLFR45 devrait s’associer à des protéines G hétérotrimériques, modulant l’activité de l’adénylate cyclase, la production d’AMPc et l’activation en aval de canaux ioniques afin de provoquer la dépolarisation neuronale et l’entrée d’informations dans les circuits olfactifs. Les modifications d’expression ou de signalisation des récepteurs olfactifs sont pertinentes pour l’étude des dysfonctions sensorielles et, plus largement, des mécanismes de régulation des RCPG, notamment le trafic des récepteurs, la désensibilisation et le contrôle transcriptionnel au cours de la différenciation neuronale. L’édition génétique de Olfr45 soutient des expériences de génomique fonctionnelle telles que la cartographie de la spécificité odorant–récepteur, l’analyse des nœuds de signalisation des RCPG dans les neurones sensoriels et la génération de modèles murins pour étudier des phénotypes liés à l’olfaction et l’homéostasie du neuroépithélium.
Olfr45 Le plasmide double nickase (m2) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Olfr45 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Olfr45. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Olfr45. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Olfr45.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.