OCTN1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-403258

Übersicht

SLC22A4 kodiert den humanen organischen Kation-/Carnitin-Transporter OCTN1 (SLC22-Familie), ein multipassiges Membranprotein, das die Aufnahme und den Efflux von Zwitterionen und organischen Kationen vermittelt, einschließlich carnitinbezogener Substrate und des Antioxidans Ergothionein. Durch die Regulation der intrazellulären Verfügbarkeit dieser Metaboliten trägt OCTN1 zur zellulären Redoxhomöostase, zur Verarbeitung von Xenobiotika und zu Stoffwechsel-Stressantworten bei, mit funktionellen Auswirkungen in epithelialen, immunologischen und barriereassoziierten Geweben. Genetische Varianten und veränderte Expression von SLC22A4 wurden mit Anfälligkeit und phänotypischer Modulation bei entzündlichen und immunassoziierten Erkrankungen in Verbindung gebracht, was es zu einem relevanten Knotenpunkt für die Untersuchung transportgetriebener Signalwege und von Umweltinteraktionen macht.

Das OCTN1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SLC22A4-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SLC22A4-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SLC22A4 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die OCTN1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SLC22A4-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der OCTN1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SLC22A4-Exone abzielen, die für die OCTN1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SLC22A4-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom OCTN1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom OCTN1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SLC22A4-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das OCTN1 HDR-Plasmid (h) und OCTN1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SLC22A4-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SLC22A4-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.