Plasmide Double Nickase (h) NSUN6: sc-415118-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) NSUN6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NSUN6 Double Nickase (h) et le plasmide NSUN6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant NSUN6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: NSUN6 Antibody (D-5): sc-393446
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) NSUN6 | sc-415118-NIC | 20 µg | $410.00 |
NSUN6 code une méthyltransférase de l’ARN cytosine-5 qui installe des modifications m5C sur des substrats d’ARN spécifiques, contribuant au contrôle épitranscriptomique de la stabilité, de la maturation et de la traduction des ARN. En régulant les profils de modification des ARN, NSUN6 peut influencer des programmes d’expression génique associés aux ribosomes ainsi que des réseaux post‑transcriptionnels plus larges qui façonnent la croissance cellulaire et les réponses au stress. Des paysages de méthylation de l’ARN altérés impliquant des enzymes de la famille NSUN ont été associés à une différenciation dérégulée et à des signalisations oncogéniques, faisant de NSUN6 un nœud pertinent pour étudier comment les marques m5C influencent le phénotype. Les travaux sur NSUN6 soutiennent des investigations mécanistiques des voies pilotées par les modifications de l’ARN en biologie du cancer et dans d’autres situations où le métabolisme de l’ARN est perturbé.
NSUN6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NSUN6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NSUN6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NSUN6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NSUN6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.