Plásmido Doble Nickase (h) NSUN6: sc-415118-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)NSUN6 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa NSUN6 (h) y el plásmido de doble nickasa NSUN6 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a NSUN6. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: NSUN6 Anticuerpo (D-5): sc-393446
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) NSUN6 | sc-415118-NIC | 20 µg | $410.00 |
NSUN6 codifica una metiltransferasa de citosina-5 en ARN que instala modificaciones m5C en sustratos de ARN específicos, contribuyendo al control epitranscriptómico de la estabilidad, el procesamiento y la traducción del ARN. Mediante la regulación de los patrones de modificación del ARN, NSUN6 puede influir en programas de expresión génica asociados a los ribosomas y en redes postranscripcionales más amplias que moldean el crecimiento celular y las respuestas al estrés. Se ha vinculado la alteración del paisaje de metilación del ARN en el que participan enzimas de la familia NSUN con una diferenciación desregulada y con señalización oncogénica, lo que convierte a NSUN6 en un nodo útil para estudiar cómo las marcas m5C impactan el fenotipo. La investigación sobre NSUN6 respalda estudios mecanísticos de vías impulsadas por modificaciones del ARN en biología del cáncer y en otras condiciones en las que el metabolismo del ARN está alterado.
NSUN6 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus NSUN6 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de NSUN6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de NSUN6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con NSUN6 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.