Nrf3 Lentiviral Activation Particles (h): sc-404543-LAC

Das humane NFE2L3-Gen kodiert den CNC-bZIP-Transkriptionsfaktor Nrf3, einen Regulator von Genexpressionsprogrammen, die die zelluläre Redox-Homöostase, die Proteostase und die metabolische Anpassung koordinieren. Nrf3 ist an stressresponsiven transkriptionellen Netzwerken beteiligt, die mit Antioxidans-Response-Elementen verknüpft sind, und überschneidet sich mit Signalwegen, die die Funktion des endoplasmatischen Retikulums sowie die Ubiquitin–Proteasom-Regulation steuern. Indem Nrf3 die basale und induzierbare Expression von Entgiftungs- und Qualitätskontrollgenen formt, kann es kontextabhängig Proliferation, Differenzierung und inflammatorische Signalgebung beeinflussen. Eine dysregulierte NFE2L3/Nrf3-Aktivität wird mit der Krebsbiologie und anderen Erkrankungen in Verbindung gebracht, die mit oxidativem Stress und veränderter Proteostase einhergehen, was mechanistische Studien zur Stressadaptation und transkriptionellen Kontrolle unterstützt.

Nrf3 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente NFE2L3-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Nrf3 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der NFE2L3-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Nrf3-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen NFE2L3-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.