Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide Double Nickase (m) NOXA1: sc-433826-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) NOXA1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NOXA1 Double Nickase (m) et le plasmide NOXA1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Noxa1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: NOXA1 Antibody (H-6): sc-398873
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) NOXA1 | sc-433826-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Noxa1** code **NOXA1**, une sous-unité organisatrice cytosolique qui favorise l’assemblage et l’activation du complexe **NOX1** (NADPH oxydase), permettant une production régulée d’espèces réactives de l’oxygène (**ROS**). Par une signalisation redox dépendante de NOX1, NOXA1 influence des voies qui contrôlent la défense innée épithéliale, la dynamique du cytosquelette et la transduction de signaux en aval des petites GTPases et d’événements de phosphorylation. Des altérations de l’activité NOXA1–NOX1 ont été associées à la biologie du stress oxydant et aux réponses inflammatoires des tissus, avec des répercussions en aval sur la fonction barrière et le remodelage. En conséquence, **Noxa1** est fréquemment étudié dans des modèles de physiologie gastro-intestinale et vasculaire où les ROS modulent la prolifération, la migration et les voies de signalisation liées aux cytokines.
NOXA1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Noxa1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Noxa1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Noxa1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Noxa1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.