Plásmido Doble Nickase (h) Nox4: sc-400298-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Nox4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Nox4 (h) y el plásmido de doble nickasa Nox4 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a NOX4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Nox4 | sc-400298-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Nox4 | sc-400298-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NOX4 codifica Nox4, una subunidad catalítica de la familia de las NADPH oxidasas que genera de manera constitutiva especies reactivas de oxígeno, principalmente peróxido de hidrógeno, para sustentar la señalización redox. La actividad de Nox4 influye en vías que regulan la diferenciación celular, la remodelación de la matriz extracelular y las respuestas adaptativas a la hipoxia y al estrés metabólico, con efectos aguas abajo sobre la señalización asociada a MAPK, TGF-β/SMAD y NF-κB. En tejidos humanos, la producción desregulada de ERO dependiente de NOX4 se ha relacionado con fenotipos de estrés oxidativo implicados en la remodelación fibrótica, la disfunción vascular y redes de señalización asociadas a tumores. Como fuente de ERO relativamente sostenida en comparación con oxidasas activadas por estímulos, Nox4 se estudia ampliamente por su papel en dar forma a la homeostasis redox compartimentalizada y a programas transcripcionales.
Nox4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus NOX4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de NOX4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de NOX4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con NOX4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.