Plasmide Double Nickase (h) NOTCH2NL: sc-417192-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) NOTCH2NL correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NOTCH2NL Double Nickase (h) et le plasmide NOTCH2NL Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant NOTCH2NL. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: NOTCH2NL Antibody (39-Y): sc-100307
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) NOTCH2NL | sc-417192-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) NOTCH2NL | sc-417192-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NOTCH2NL code un membre, spécifique à l’humain, de la famille de protéines de type Notch2, qui module la signalisation canonique Notch, une voie centrale pour la spécification du destin cellulaire, la prolifération et la différenciation au cours du neurodéveloppement. En influençant l’activité des récepteurs Notch et les programmes transcriptionnels en aval, NOTCH2NL contribue à la régulation du maintien des progéniteurs neuraux et du calendrier de la différenciation neuronale. Les variations du nombre de copies et l’expression altérée des paralogues de NOTCH2NL ont été associées à des phénotypes du développement cérébral humain et à des troubles du neurodéveloppement, ce qui soutient sa pertinence pour des études sur l’expansion corticale, la maturation synaptique et les réseaux développementaux de régulation génique.
NOTCH2NL Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NOTCH2NL dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NOTCH2NL. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NOTCH2NL. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NOTCH2NL.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.