Plasmide Double Nickase (h) Noggin: sc-402090-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Noggin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Noggin Double Nickase (h) et le plasmide Noggin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant NOG. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Noggin Antibody (2C10): sc-293439
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Noggin | sc-402090-NIC | 20 µg | $410.00 |
NOG code la noggin, un antagoniste sécrété des protéines morphogénétiques osseuses (BMP) qui façonne la mise en place des patrons embryonnaires et régule la différenciation ostéogénique et neuroectodermique en limitant la signalisation BMP via les récepteurs et SMAD1/5/8. En se liant à BMP2, BMP4 et à des ligands apparentés dans l’espace extracellulaire, la noggin module des gradients qui contrôlent les décisions de destinée cellulaire, la morphogenèse tissulaire et l’homéostasie du squelette. La perturbation de la restriction des BMP dépendante de NOG a été associée à des malformations squelettiques congénitales et à des défauts du développement craniofacial, et un déséquilibre de la voie BMP est fréquemment étudié dans des contextes de fibrose et de remodelage du microenvironnement tumoral. En tant que nœud de signalisation, NOG est largement utilisé pour explorer les interactions BMP/TGF-β et les programmes de différenciation dans des modèles de cellules souches et progénitrices humaines.
Noggin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NOG dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NOG. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NOG. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NOG.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.