Noggin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-402090-KO-2
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Noggin El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Noggin, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Noggin Anticuerpo (2C10): sc-293439
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Noggin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-402090-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
NOG codifica noggin, una glicoproteína secretada que se une y neutraliza ligandos de BMP (en particular BMP2, BMP4 y BMP7), modulando así los gradientes de señalización de la superfamilia BMP/TGF-β durante el desarrollo y la homeostasis de los tejidos adultos. Al antagonizar la activación de los receptores de BMP y la fosforilación posterior de SMAD1/5/8, noggin influye en las decisiones de destino celular, la diferenciación osteogénica y condrogénica, y los procesos de patrón en linajes mesenquimales y neurales. La actividad alterada de NOG se asocia con una morfogénesis esquelética y una formación articular desreguladas, y se estudia con frecuencia en contextos que implican remodelado y diferenciación anómalos impulsados por BMP. Como modulador extracelular clave de la señalización por morfógenos, noggin es relevante para investigaciones en biología del desarrollo, biología del hueso y del cartílago, y la interacción entre vías con programas WNT y FGF.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Noggin (h2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NOG en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NOG junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NOG tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Noggin.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NOG para la investigación de la señalización de Noggin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de NOG críticos para la función de Noggin
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NOG para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Noggin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Noggin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NOG. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Noggin (h) y el plásmido HDR Noggin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NOG para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NOG definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.