Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401641

Descripción general

CHRNB2 codifica la subunidad β2 de los receptores nicotínicos neuronales de acetilcolina (nAChR), canales catiónicos activados por ligando que se ensamblan como pentámeros heteroméricos junto con subunidades α para regular la excitabilidad de la membrana. Tras la unión de acetilcolina o nicotina, los nAChR que contienen β2 median la entrada de Na⁺ y Ca²⁺, acoplando la señalización colinérgica a vías dependientes de calcio que influyen en la liberación de neurotransmisores, la plasticidad sináptica y el desarrollo de circuitos. La actividad de CHRNB2 se relaciona con procesos que regulan la recompensa, la atención y la activación (arousal) mediante la modulación de redes dopaminérgicas y de otros sistemas neuromoduladores. Alteraciones genéticas y funcionales en CHRNB2 se han asociado con fenotipos neuropsiquiátricos y susceptibilidad a crisis epilépticas, lo que respalda su relevancia para estudios mecanísticos en modelos neuronales.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CHRNB2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CHRNB2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CHRNB2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CHRNB2 para la investigación de la señalización de Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CHRNB2 críticos para la función de Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CHRNB2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CHRNB2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 (h) y el plásmido HDR Nicotinic Acetylcholine Receptor beta 2/CHRNB2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CHRNB2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CHRNB2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.