NICE4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411379

Descripción general

UBAP2L (NICE4) codifica una proteína asociada a ubiquitina con capacidad de unión a ARN, que se localiza en gránulos citoplasmáticos de ribonucleoproteínas y contribuye al control posranscripcional de la expresión génica. Se ha implicado en el ensamblaje de gránulos de estrés y en el metabolismo del ARN, apoyando la adaptación celular al estrés proteotóxico y oxidativo, a la vez que influye en programas de proliferación y supervivencia. A través de estas funciones, UBAP2L se conecta con vías que regulan la traducción y la estabilidad del ARNm, y su desregulación se ha descrito en estudios sobre crecimiento asociado al cáncer y fenotipos metastásicos. Analizar la función de NICE4 puede ayudar a aclarar cómo la dinámica de los gránulos de ARN y la señalización relacionada con la ubiquitina coordinan transiciones del estado celular relevantes para la biología de la enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO NICE4 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen UBAP2L en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del UBAP2L junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de UBAP2L tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NICE4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en UBAP2L para la investigación de la señalización de NICE4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de UBAP2L críticos para la función de NICE4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de UBAP2L para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido NICE4 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido NICE4 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus UBAP2L. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NICE4 (h) y el plásmido HDR NICE4 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología UBAP2L para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana UBAP2L definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.