Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (m) NFKBIA/IkB alpha: sc-421878-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) NFKBIA/IkB alpha correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NFKBIA/IkB alpha Double Nickase (m) et le plasmide NFKBIA/IkB alpha Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Nfkbia. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: NFKBIA/IkB alpha Antibody (H-4): sc-1643
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) NFKBIA/IkB alpha | sc-421878-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Nfkbia** code **NFKBIA/IκBα**, un inhibiteur cytoplasmique qui se lie aux dimères de NF‑κB (dont RELA/p50) et les retient hors du noyau en conditions basales. Lors de signaux inflammatoires ou de stress, une phosphorylation dépendante d’IKK déclenche l’ubiquitination puis la dégradation protéasomale d’IκBα, ce qui permet la translocation nucléaire de NF‑κB et le contrôle transcriptionnel de cytokines, de facteurs de survie et de régulateurs de rétrocontrôle. Cette protéine est au cœur de la signalisation canonique NF‑κB et interfère avec les voies TNF, IL‑1, TLR et des récepteurs de l’antigène, façonnant les réponses immunitaires innée et adaptative. Une dérégulation de la fonction de **Nfkbia** ou une altération du renouvellement d’IκBα a été associée à une inflammation aberrante, à des états d’activation des cellules immunitaires et à des contextes de signalisation oncogénique où l’activité de NF‑κB est constitutivement engagée.
NFKBIA/IkB alpha Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Nfkbia dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Nfkbia. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Nfkbia. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Nfkbia.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.