Date published: 2026-7-10
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The Double Nickase Plasmid features a U6 promoter for sgRNA expression, a 20 nt targeting sequence, and a gRNA scaffold to guide Cas9n. It includes a CBh promoter for Cas9n (D10A) and puromycin resistance, GFP for transfection verification, and nuclear localization signals (NLS). The 2A peptide allows co-expression of Cas9n and Puro from a single promoter, enabling precise genome editing with reduced off-target effects.
The Double Nickase Plasmid features a U6 promoter for sgRNA expression, a 20 nt targeting sequence, and a gRNA scaffold to guide Cas9n. It includes a CBh promoter for Cas9n (D10A) and puromycin resistance, GFP for transfection verification, and nuclear localization signals (NLS). The 2A peptide allows co-expression of Cas9n and Puro from a single promoter, enabling precise genome editing with reduced off-target effects.
The Double Nickase Plasmid features a U6 promoter for sgRNA expression, a 20 nt targeting sequence, and a gRNA scaffold to guide Cas9n. It includes a CBh promoter for Cas9n (D10A) and puromycin resistance, GFP for transfection verification, and nuclear localization signals (NLS). The 2A peptide allows co-expression of Cas9n and Puro from a single promoter, enabling precise genome editing with reduced off-target effects.
The Double Nickase Plasmid features a U6 promoter for sgRNA expression, a 20 nt targeting sequence, and a gRNA scaffold to guide Cas9n. It includes a CBh promoter for Cas9n (D10A) and puromycin resistance, GFP for transfection verification, and nuclear localization signals (NLS). The 2A peptide allows co-expression of Cas9n and Puro from a single promoter, enabling precise genome editing with reduced off-target effects.
Cas9n Nickase gRNA Plasmid Targeting: Dual gRNA plasmids create single-strand nicks at precise DNA sequences for efficient genome editing using Cas9n Nickase.
Cas9n Nickase gRNA Plasmid Targeting: Dual gRNA plasmids create single-strand nicks at precise DNA sequences for efficient genome editing using Cas9n Nickase.
This image illustrates the Cas9n Nickase mechanism used for precise genome editing. Two plasmids (Plasmid 1 and Plasmid 2) are shown, each containing a targeted DNA sequence. The system utilizes single-guide RNAs (sgRNA) to direct Cas9n Nickase to specific genomic locations, represented by the blue and pink DNA strands. The sgRNA scaffold aids in guiding Cas9n to the 20 nucleotide (nt) target sequence on the DNA. Cas9n makes single-strand cuts at NCC and NGG sites, enabling precise gene modifications without creating double-strand breaks.
This image illustrates the Cas9n Nickase mechanism used for precise genome editing. Two plasmids (Plasmid 1 and Plasmid 2) are shown, each containing a targeted DNA sequence. The system utilizes single-guide RNAs (sgRNA) to direct Cas9n Nickase to specific genomic locations, represented by the blue and pink DNA strands. The sgRNA scaffold aids in guiding Cas9n to the 20 nucleotide (nt) target sequence on the DNA. Cas9n makes single-strand cuts at NCC and NGG sites, enabling precise gene modifications without creating double-strand breaks.
The Double Nickase Plasmid features a U6 promoter for sgRNA expression, a 20 nt targeting sequence, and a gRNA scaffold to guide Cas9n. It includes a CBh promoter for Cas9n (D10A) and puromycin resistance, GFP for transfection verification, and nuclear localization signals (NLS). The 2A peptide allows co-expression of Cas9n and Puro from a single promoter, enabling precise genome editing with reduced off-target effects.

Neurofibromin 2/NF2/Merlin Double Nickase Plasmid (h): sc-400504-NIC

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Datenblätter
  • Zielspezies: human
  • 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
  • Das Neurofibromin 2/NF2/Merlin Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
  • gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
  • Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
  • Neurofibromin 2/NF2/Merlin Double-Nickase-Plasmid (h) und Neurofibromin 2/NF2/Merlin Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf NF2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
  • Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Neurofibromin 2/NF2/Merlin: sc-55575
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    Neurofibromin 2/NF2/Merlin Double Nickase Plasmid (h)

    sc-400504-NIC
    20 µg
    		$410.00

    Neurofibromin 2/NF2/Merlin Double Nickase Plasmid (h2)

    sc-400504-NIC-2
    20 µg
    		$410.00

    NF2 kodiert Neurofibromin 2 (Merlin), einen Membran-Zytoskelett-Adapter, der Signale aus Zell-Zell-Kontakten und dem Aktinkortex integriert, um die Proliferation zu begrenzen und die epitheliale Architektur aufrechtzuerhalten. Merlin wirkt als Tumorsuppressor, indem es die Kontaktinhibition reguliert und Signalwege wie Hippo-YAP/TAZ, Rezeptor-Tyrosinkinase-Signale sowie Zytoskelettdynamiken moduliert, die Migration und mechanische Signalübertragung beeinflussen. Der Verlust oder die Inaktivierung von NF2 stört diese Netzwerke der Wachstumskontrolle und fördert einen aberranten Eintritt in den Zellzyklus sowie veränderte adhäsionsabhängige Signalgebung. Eine NF2-Fehlfunktion ist eng mit der Neurofibromatose Typ 2 und Merlin-defizienten Tumoren wie Schwannomen und Meningeomen verknüpft und macht NF2 zu einem zentralen Knotenpunkt für die Untersuchung von Wachstumsregulation und Mechanotransduktion in menschlichen Zellen.

    Neurofibromin 2/NF2/Merlin Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des NF2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von NF2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die NF2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.

    Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit NF2-Störung.

    Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.

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