Nek7 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405218-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Nek7O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Nek7 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Nek7 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NEK7. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Nek7 Anticorpo (B-5): sc-393539
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Nek7 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405218-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Nek7 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405218-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NEK7 codifica a quinase de serina/treonina Nek7, uma quinase relacionada à NIMA que regula a função do centrossomo, a montagem do fuso mitótico e a progressão pela mitose, coordenando a dinâmica dos microtúbulos e os checkpoints do ciclo celular. A Nek7 também participa de sinalização responsiva ao estresse, incluindo a regulação da ativação do inflamassoma NLRP3 e de respostas inflamatórias a jusante, conectando o controle da divisão celular a vias da imunidade inata. A atividade ou expressão desregulada de NEK7 tem sido associada à proliferação aberrante e à instabilidade genômica, o que a torna relevante para estudos de biologia tumoral e de patologias impulsionadas pelo ciclo celular. Como resultado, o NEK7 é frequentemente investigado em modelos de regulação mitótica, remodelamento do citoesqueleto e fenótipos celulares associados à inflamação.
Nek7 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NEK7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NEK7. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NEK7. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NEK7 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.