NAT-3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421825

Descripción general

El gen Nat3 de ratón codifica NAT-3, un miembro de la familia de las N-acetiltransferasas de arilaminas que cataliza reacciones de N-acetilación dependientes de acetil-CoA implicadas en la biotransformación de xenobióticos. NAT-3 contribuye a la capacidad de desintoxicación celular al modular la reactividad química y la eliminación de aminas aromáticas y compuestos relacionados, en interacción con procesos metabólicos hepáticos y extrahepáticos. La variación en la actividad de las enzimas NAT es ampliamente relevante para la susceptibilidad a sustancias químicas y las respuestas tisulares impulsadas por tóxicos, lo que respalda el uso de modelos de Nat3 en estudios de estrés e inflamación asociados al metabolismo. En ratones, la pérdida de función de Nat3 puede ayudar a aclarar cómo el metabolismo dependiente de la acetilación influye en la homeostasis celular downstream bajo condiciones de exposición definidas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO NAT-3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Nat3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Nat3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Nat3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NAT-3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Nat3 para la investigación de la señalización de NAT-3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Nat3 críticos para la función de NAT-3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Nat3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido NAT-3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido NAT-3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Nat3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NAT-3 (m) y el plásmido HDR NAT-3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Nat3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Nat3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.