Nap-22 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (r): sc-437379

Descripción general

Nap-22 (también conocida como BASP1) es una proteína asociada a la membrana, enriquecida en neuronas, implicada en la regulación del crecimiento axonal, la extensión de neuritas y la función sináptica mediante interacciones con fosfolípidos y complejos de señalización en la membrana plasmática. Participa en la plasticidad neuronal dependiente de la actividad y se ha relacionado con la organización del citoesqueleto y con procesos de tráfico vesicular que modulan la dinámica del cono de crecimiento. Nap-22 también se ha estudiado en el contexto de la regulación transcripcional a través de interacciones nucleares, conectando señales extracelulares con programas de expresión génica relevantes para la diferenciación neuronal. La alteración de la expresión o la localización de Nap-22 se ha asociado con líneas de investigación en neurodesarrollo y neurodegeneración en las que se ven perturbadas la señalización de membrana y la remodelación sináptica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Nap-22 (r) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen en líneas celulares rat. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Nap-22.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en para la investigación de la señalización de Nap-22, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de críticos para la función de Nap-22
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Nap-22 CRISPR/Cas9 KO (r) y el plásmido Nap-22 CRISPR/Cas9 KO (r2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus . Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Nap-22 (r) y el plásmido HDR Nap-22 (r2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.