Plásmido Doble Nickase (m) NALP6: sc-430389-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)NALP6 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa NALP6 (m) y el plásmido de doble nickasa NALP6 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Nlrp6. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) NALP6 | sc-430389-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) NALP6 | sc-430389-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen Nlrp6 del ratón codifica NALP6, un receptor citosólico tipo NOD que actúa como sensor de la inmunidad innata y regulador de la señalización asociada al inflamasoma. NALP6 influye en la activación de la caspasa-1, la maduración de citocinas de la familia de IL-1 y programas transcripcionales inflamatorios posteriores, conectando la detección de microbios y señales de daño con las respuestas inmunitarias epiteliales y mieloides. En el tracto gastrointestinal, se ha implicado a NLRP6 en el mantenimiento de la función de barrera mucosa y en el modelado de las interacciones huésped–microbioma, con relevancia para modelos de colitis e inflamación intestinal. La actividad alterada de NLRP6 también se ha estudiado en el contexto de la susceptibilidad a infecciones y la homeostasis tisular impulsada por la inflamación.
NALP6 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Nlrp6 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Nlrp6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Nlrp6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Nlrp6 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.