NALP1A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431476

Descripción general

El gen murino **Nlrp1a** codifica **NALP1A**, un receptor tipo NOD citosólico que actúa como sensor de inflamasoma, conectando la detección del estrés celular con la señalización inmunitaria innata. Tras su activación, NALP1A favorece el ensamblaje de complejos de inflamasoma que impulsan la activación de la caspasa‑1 y la posterior maduración de citocinas proinflamatorias como **IL‑1β** e **IL‑18**, acoplando la detección de señales de peligro a programas de muerte celular piroptótica. Esta vía se integra con el cebado mediado por **NF‑κB**, las respuestas al estrés mitocondrial y redes más amplias de receptores de reconocimiento de patrones que regulan la inflamación tisular. La señalización del inflamasoma desregulada se asocia a fenotipos inflamatorios y autoinmunes, y se estudia ampliamente en el contexto de las interacciones hospedador–patógeno y de desencadenantes inflamatorios estériles.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO NALP1A (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Nlrp1a en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Nlrp1a junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Nlrp1a tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NALP1A.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Nlrp1a para la investigación de la señalización de NALP1A, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Nlrp1a críticos para la función de NALP1A
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Nlrp1a para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido NALP1A CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido NALP1A CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Nlrp1a. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NALP1A (m) y el plásmido HDR NALP1A (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Nlrp1a para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Nlrp1a definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.