Plasmide Double Nickase (m) NALP10: sc-434050-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) NALP10 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NALP10 Double Nickase (m) et le plasmide NALP10 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Nlrp10. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) NALP10 | sc-434050-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Nlrp10** code la protéine **NALP10 (NLRP10)**, un membre de la famille des récepteurs de type NOD impliqué dans la régulation de l’immunité innée et les voies de signalisation liées à l’inflammasome. Bien que NLRP10 ne possède pas le domaine LRR C‑terminal canonique, il a été associé au contrôle des réponses inflammatoires via la modulation de voies liées à NF‑κB, de la production de cytokines, ainsi que des fonctions des cellules myéloïdes et dendritiques qui orientent l’immunité adaptative. L’activité de Nlrp10 s’articule avec des réseaux de récepteurs de reconnaissance des motifs (PRR) influençant l’activation des leucocytes, la présentation de l’antigène et l’homéostasie immunitaire des muqueuses. La dérégulation des composants des voies NLR est largement pertinente pour les mécanismes des maladies inflammatoires, ce qui fait de **Nlrp10** un locus utile pour des études mécanistiques de la signalisation immunitaire et de la différenciation des cellules immunitaires dans des modèles murins.
NALP10 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Nlrp10 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Nlrp10. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Nlrp10. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Nlrp10.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.