Plásmido Doble Nickase (h) N4BP2: sc-412585-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)N4BP2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa N4BP2 (h) y el plásmido de doble nickasa N4BP2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a N4BP2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) N4BP2 | sc-412585-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) N4BP2 | sc-412585-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
N4BP2 (proteína 2 de unión a NEDD4) codifica una gran proteína intracelular implicada en la señalización asociada a ubiquitina mediante interacciones con ligasas E3 de la familia NEDD4, lo que sugiere un papel en la regulación del recambio y el tráfico de proteínas. Evidencia emergente vincula a N4BP2 con vías que moldean las respuestas inmunitarias e inflamatorias, incluida la modulación de la señalización relacionada con NF-κB y de los estados de activación celular. La expresión alterada o la disrupción genética de N4BP2 se ha estudiado en el contexto de la biología de tumores hematológicos y sólidos, donde el control dependiente de ubiquitina de la señalización y de la proteostasis puede influir en la proliferación, las respuestas al estrés y el mantenimiento del genoma. Como resultado, N4BP2 es un objetivo útil para estudios mecanísticos de los circuitos de ubiquitina y de los programas transcripcionales aguas abajo en células humanas.
N4BP2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus N4BP2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de N4BP2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de N4BP2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con N4BP2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.