Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
N-CoR Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422771
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- N-CoR El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico N-CoR, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: N-CoR Anticuerpo (F-1): sc-515934
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
N-CoR Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422771 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen **Ncor1** de ratón codifica el correpresor nuclear 1 del receptor (N‑CoR), una proteína andamiaje que ensambla complejos de represión transcripcional con **HDAC3**, **TBL1/TBLR1** y otros factores para regular la accesibilidad de la cromatina y la expresión génica. N‑CoR modula la señalización de receptores nucleares y redes transcripcionales más amplias que gobiernan la diferenciación, la homeostasis metabólica y la programación de células inmunes, incluida la regulación de conjuntos de genes inflamatorios. Mediante la desacetilación coordinada y el reclutamiento de correpresores, **Ncor1** influye en el compromiso de linaje y en las respuestas celulares a señales hormonales y de citocinas. La desregulación de la represión dependiente de N‑CoR se ha vinculado con estados transcripcionales aberrantes relevantes para la biología del cáncer, fenotipos del neurodesarrollo y disfunción inmunitaria en modelos experimentales.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO N-CoR (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ncor1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ncor1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ncor1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína N-CoR.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ncor1 para la investigación de la señalización de N-CoR, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Ncor1 críticos para la función de N-CoR
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ncor1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido N-CoR CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido N-CoR CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ncor1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR N-CoR (m) y el plásmido HDR N-CoR (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ncor1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ncor1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.