MZF-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403142-NIC

MZF1 (myeloid zinc finger 1) codifica o MZF-1, um fator de transcrição do tipo dedo de zinco C2H2 que se liga a elementos regulatórios ricos em GC para coordenar programas de expressão gênica envolvidos na diferenciação hematopoética, no controle do ciclo celular e no comprometimento de linhagem. Por meio da modulação de redes transcricionais que governam proliferação, apoptose e maturação mieloide, o MZF-1 pode influenciar processos como a manutenção de células-tronco/progenitoras e a sinalização responsiva ao estresse. Alterações na expressão ou na atividade de MZF1 têm sido associadas a estados transcricionais desregulados observados em neoplasias hematológicas e outros cânceres, nos quais pode afetar invasão, sobrevivência ou assinaturas gênicas associadas à diferenciação. Como regulador nuclear que se liga ao DNA, o MZF-1 é frequentemente estudado para mapear a ocupação de promotores, definir circuitos transcricionais e dissecar funções oncogênicas ou supressoras de tumor dependentes do contexto.

MZF-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MZF1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MZF1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MZF1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MZF1 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.