Mucin 5B/MUC5B CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401077

概要

MUC5Bはムチン5Bをコードしており、ムチン5Bは高分子量でゲル形成性をもつ分泌型ムチンで、気道および唾液の粘液の主要な構造要素です。MUC5Bは、広範なO-グリコシル化と重合を通じて、粘液線毛クリアランス、病原体の捕捉、上皮バリア恒常性に寄与し、その発現は分泌上皮における炎症プログラムおよび分化プログラムによって制御されます。MUC5Bの量やレオロジー特性の変化は、粘液輸送の破綻や慢性的な気道リモデリングと関連し、遺伝学的変化および発現変化は、肺線維症や粘液閉塞性肺疾患の表現型と関連付けられています。多様な指標が得られる分泌型糖タンパク質として、MUC5Bは上皮分化、ER／ゴルジ体での分泌加工、ならびに自然免疫防御シグナルの文脈で広く研究されています。

Mucin 5B/MUC5B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMUC5B遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MUC5B内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MUC5Bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Mucin 5B/MUC5Bタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Mucin 5B/MUC5Bシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MUC5B欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Mucin 5B/MUC5Bの機能に不可欠なMUC5Bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MUC5Bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Mucin 5B/MUC5B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMucin 5B/MUC5B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MUC5B遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Mucin 5B/MUC5B HDRプラスミド（h）および Mucin 5B/MUC5B HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMUC5Bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMUC5B標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。