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Mucin 5AC/MUC5AC双切口酶质粒(m) | sc-421752-NIC | 20 µg | $410.00 |
Muc5ac 编码形成凝胶的黏蛋白 Mucin 5AC/MUC5AC,这是一种高度 O-糖基化的分泌型糖蛋白,是小鼠上皮气道与胃肠道黏液屏障的重要结构成分。其受调控的表达通过塑造黏液的黏弹性并限制病原体与细胞表面的接触,从而支持黏液纤毛清除、上皮水合以及先天防御。Muc5ac 可在上皮分化和炎症性重塑过程中被诱导,其调控涉及对细胞因子和应激反应敏感的程序,包括 EGFR/MAPK 信号通路以及 IL-13–STAT6 驱动的杯状细胞化生。Muc5ac 产生失调及黏蛋白糖基化改变与呼吸系统疾病模型中的黏液栓塞和慢性炎症有关,也与胃肠道病理中的上皮屏障改变相关,因此常被用作研究气道高分泌和黏膜免疫的常用读出指标。
Mucin 5AC/MUC5AC 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Muc5ac 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Muc5ac内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Muc5ac的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Muc5ac基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。