Plasmide Double Nickase (h) MRP7: sc-406412-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MRP7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MRP7 Double Nickase (h) et le plasmide MRP7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ABCC10. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MRP7 | sc-406412-NIC | 20 µg | $410.00 |
ABCC10 code pour le transporteur humain de la famille ATP-binding cassette MRP7 (ABCC10), une pompe d’efflux de la membrane plasmique qui utilise l’hydrolyse de l’ATP pour exporter un large éventail de xénobiotiques et de métabolites endogènes. L’activité de MRP7 contribue à la détoxification cellulaire et influence le devenir intracellulaire des médicaments, en s’inscrivant à l’interface de voies impliquées dans le transport membranaire, le métabolisme des lipides et les réponses au stress cellulaire. Une expression ou une fonction d’ABCC10/MRP7 dysrégulée a été associée à des phénotypes de chimiorésistance modifiés dans des modèles de cancer, ainsi qu’à des variations de traits pharmacocinétiques, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude de la biologie des transporteurs et des interactions médicament–transporteur. En tant que membre de la sous-famille ABCC, MRP7 constitue également un système exploitable pour analyser comment les transporteurs ABC modèlent les fonctions de barrière et la distribution tissulaire spécifique des petites molécules.
MRP7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ABCC10 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ABCC10. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ABCC10. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ABCC10.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.