MMP9 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400083-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MMP9O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MMP9 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MMP9 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MMP9. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MMP9 Anticorpo (E-11): sc-393859
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MMP9 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400083-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MMP9 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400083-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MMP9 (metaloproteinase de matriz 9) codifica uma endopeptidase secretada dependente de zinco que degrada componentes da matriz extracelular, como o colágeno tipo IV e a gelatina, coordenando o remodelamento tecidual e a renovação da membrana basal. A atividade de MMP9 é regulada pela ativação de sua forma zimogênica e pela inibição por TIMPs, o que a conecta a redes de proteases que modulam a migração celular, a dinâmica de adesão e a sinalização inflamatória. Ela participa de processos como angiogênese, extravasamento de leucócitos e reparo de feridas, sendo frequentemente estudada no contexto de programas de remodelamento da MEC a jusante de citocinas, fatores de crescimento e sinalização MAPK/NF-κB. A desregulação da expressão ou da atividade de MMP9 tem sido associada à biologia de invasão e metástase no câncer, ao remodelamento cardiovascular, a distúrbios inflamatórios crônicos e à neuroinflamação.
MMP9 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MMP9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MMP9. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MMP9. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MMP9 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.