Plasmide Double Nickase (h) mGluR-4: sc-404894-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) mGluR-4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide mGluR-4 Double Nickase (h) et le plasmide mGluR-4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GRM4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: mGluR-4 Antibody (B-8): sc-376485
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) mGluR-4 | sc-404894-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) mGluR-4 | sc-404894-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRM4 code le récepteur métabotropique du glutamate 4 (mGluR-4), un RCPG de classe C qui se couple principalement aux protéines Gi/o pour atténuer l’activité de l’adénylate cyclase et réduire l’AMPc intracellulaire. mGluR-4 est enrichi au niveau présynaptique, où il module la libération de neurotransmetteurs, façonnant la transmission synaptique et la plasticité via la signalisation AMPc/PKA et des effets en aval sur la fonction des canaux ioniques et le cycle des vésicules. En ajustant la sortie des circuits excitateurs et inhibiteurs, GRM4 est étudié dans des voies qui régissent le contrôle moteur, le traitement sensoriel et la signalisation neuro-immune dans le système nerveux central. Une signalisation glutamatergique dérégulée impliquant GRM4 a été examinée dans le contexte de la biologie des maladies neuropsychiatriques et neurodégénératives, ce qui en fait un point d’entrée moléculaire pour des études mécanistiques des phénotypes synaptiques et des circuits.
mGluR-4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GRM4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GRM4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GRM4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GRM4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.