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Mfn1/Mitofusin 1双切口酶质粒(m) | sc-426545-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mfn1/Mitofusin 1双切口酶质粒(m2) | sc-426545-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Mfn1 基因编码线粒体融合蛋白 1(mitofusin 1),这是一种与动力蛋白相关的 GTP 酶,嵌入在线粒体外膜上,驱动线粒体的系链与融合。MFN1 协调线粒体网络结构,支持氧化磷酸化效率,并通过线粒体动力学通路参与线粒体 DNA 的维持与应激适应。其活性还会通过影响膜电位、嵴结构组织以及细胞器间通讯,与线粒体自噬和凋亡信号等质量控制过程发生交叉。MFN1 相关融合过程的失调与生物能量学异常有关,常在线粒体重塑影响细胞表型的研究中被重点关注,例如神经退行性变、心脏-代谢功能障碍以及癌细胞状态转换等情境。
Mfn1/Mitofusin 1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Mfn1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Mfn1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Mfn1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Mfn1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。