Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MFF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402756
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MFF O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MFF, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MFF Anticorpo (B-2): sc-398617
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MFF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402756 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O MFF humano (fator de fissão mitocondrial) é um adaptador da membrana externa mitocondrial que recruta a GTPase relacionada à dinamina DRP1 para promover a divisão de mitocôndrias e peroxissomos, moldando a morfologia e a distribuição dessas organelas. Ao controlar o equilíbrio entre fissão e fusão, o MFF influencia a arquitetura da rede mitocondrial, a mitofagia, a sensibilidade à apoptose e a bioenergética celular, com efeitos a jusante sobre a fosforilação oxidativa, o manejo de ROS e a sinalização de estresse. A perturbação da fissão dependente de MFF está ligada a dinâmicas mitocondriais alteradas e tem sido associada a fenótipos de neurodesenvolvimento e neurodegeneração, bem como a disfunções metabólicas mais amplas, nas quais o controle de qualidade das organelas é comprometido. Como um nó central nas vias de dinâmica mitocondrial, o MFF é frequentemente estudado em contextos de homeostase de organelas, sinalização imune inata e decisões de destino celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MFF (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MFF em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MFF, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MFF na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MFF.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MFF para a investigação da sinalização de MFF, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MFF críticos para a função MFF
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MFF para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MFF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MFF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MFF. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MFF Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MFF (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MFF para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MFF definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.