Plasmide Double Nickase (m) Metaxin 2: sc-424699-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Metaxin 2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Metaxin 2 Double Nickase (m) et le plasmide Metaxin 2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Mtx2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Metaxin 2 Antibody (H-2): sc-514231
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Metaxin 2 | sc-424699-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Metaxin 2 | sc-424699-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Chez la souris, Mtx2 code la métaxine 2, une protéine de la membrane externe mitochondriale qui contribue à l’import des protéines mitochondriales en soutenant l’assemblage et le fonctionnement de la machinerie de translocation de la membrane externe (TOM). La métaxine 2 aide à maintenir la protéostasie mitochondriale, l’intégrité membranaire et une biogenèse efficace, influençant ainsi la phosphorylation oxydative et, plus largement, le métabolisme énergétique cellulaire. Une perturbation des voies d’import mitochondrial peut déclencher des réponses au stress, modifier la susceptibilité à l’apoptose et entraîner des effets secondaires sur le métabolisme lipidique et la signalisation innée. En tant que composant de l’homéostasie mitochondriale, MTX2 est couramment étudiée dans des modèles de dysfonction mitochondriale pertinents pour la neurodégénérescence, des phénotypes métaboliques et la sensibilité au stress cellulaire.
Metaxin 2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Mtx2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Mtx2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Mtx2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Mtx2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.