Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Menin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402759
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Menin El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Menin, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Menin Anticuerpo (B-9): sc-374371
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Menin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402759 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
MEN1 codifica menin, una proteína andamiaje predominantemente nuclear que coordina la regulación transcripcional y el estado de la cromatina mediante interacciones con modificadores de histonas y factores de transcripción específicos de secuencia. Menin está estrechamente vinculada al control epigenético de programas de expresión génica que gobiernan la progresión del ciclo celular, la diferenciación y la estabilidad del genoma, incluidas vías asociadas a los complejos MLL/COMPASS y otros reguladores asociados a la cromatina. La alteración de MEN1 perturba la homeostasis del linaje endocrino y las redes transcripcionales implicadas en la biología supresora de tumores. Como regulador dependiente del contexto, menin se estudia ampliamente por sus efectos en tejidos productores de hormonas, las respuestas al daño del ADN y la fidelidad transcripcional.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Menin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MEN1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MEN1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MEN1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Menin.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MEN1 para la investigación de la señalización de Menin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de MEN1 críticos para la función de Menin
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MEN1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Menin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Menin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MEN1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Menin (h) y el plásmido HDR Menin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MEN1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MEN1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.