Plásmido Doble Nickase (h) Meis1: sc-401481-NIC

MEIS1 codifica un factor de transcripción homeobox de la clase TALE que se asocia con proteínas PBX y HOX para controlar programas de expresión génica específicos de linaje durante el desarrollo y la homeostasis de los tejidos adultos. En células hematopoyéticas, MEIS1 contribuye a redes transcripcionales que regulan el mantenimiento de células madre/progenitoras, el control del ciclo celular y la diferenciación, y se integra con vías que gobiernan el estado de la cromatina y la actividad de los potenciadores. La expresión desregulada de MEIS1 o la alteración de sus potenciadores se ha vinculado con la leucemogénesis, incluidas las leucemias agudas con reordenamientos de MLL, en las que puede cooperar con programas del clúster HOXA. MEIS1 también está implicado en procesos cardiovasculares y del neurodesarrollo, lo que lo convierte en un nodo útil para estudiar la regulación transcripcional en múltiples sistemas de órganos.

Meis1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MEIS1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MEIS1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MEIS1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MEIS1 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.