Plasmide CRISPR/Cas9 KO Meis1 (h): sc-401481

Présentation

MEIS1 code pour Meis1, un facteur de transcription à homéoboîte de type TALE qui coopère avec les protéines HOX et PBX pour contrôler des programmes d’expression génique régissant la mise en place du plan d’organisation embryonnaire, la différenciation hématopoïétique et l’engagement des destinées cellulaires. Meis1 influence des réseaux transcriptionnels associés à la chromatine impliqués dans la prolifération, la spécification des lignages et le maintien des cellules souches/progénitrices, avec des rôles dépendant du contexte selon les tissus. Une régulation altérée de MEIS1 a été associée à une hématopoïèse dérégulée et à des circuits transcriptionnels oncogéniques dans les leucémies, et des études d’association génétique impliquent MEIS1 dans des traits liés à la neurobiologie, tels que le syndrome des jambes sans repos. En tant que régulateur nucléaire, MEIS1 est largement utilisé comme modèle pour étudier les réseaux de régulation génique du développement et la coopération entre facteurs de transcription.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Meis1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène MEIS1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du MEIS1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert MEIS1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Meis1.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en MEIS1 pour l'étude de la signalisation de Meis1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de MEIS1 essentiels à la fonction de Meis1
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de MEIS1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le Meis1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Meis1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus MEIS1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le Meis1 plasmide HDR (h) et le Meis1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie MEIS1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles MEIS1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.