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MEF-2D双切口酶质粒(h) | sc-403475-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MEF-2D双切口酶质粒(h2) | sc-403475-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MEF2D 编码人类转录因子 MEF-2D。MEF-2D 属于 MADS-box/MEF2 家族的 DNA 结合蛋白,能够将钙依赖性信号传导与特定情境下的基因表达程序整合起来。MEF-2D 通过与 IIa 类 HDAC 等辅因子协同作用,并响应 MAPK 与钙调神经磷酸酶(calcineurin)通路,在包括肌源性与神经元状态在内的多种谱系中调控分化与适应性转录。借助这些对信号敏感的相互作用,MEF-2D 有助于协调染色质状态与转录输出,从而影响细胞周期调控、生存以及谱系身份的建立与维持。MEF2D 活性失调及其驱动的转录网络改变已被认为与癌症相关的转录重编程和血液系统恶性肿瘤的遗传机制有关,因此可作为通路与疾病机制研究中的一个功能性关键节点。
MEF-2D 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MEF2D 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MEF2D内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MEF2D的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MEF2D基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。