Plásmido Doble Nickase (m) MEF-2C: sc-421620-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)MEF-2C consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MEF-2C (m) y el plásmido de doble nickasa MEF-2C (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Mef2c. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MEF-2C Anticuerpo (G-5): sc-518152
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) MEF-2C | sc-421620-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) MEF-2C | sc-421620-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mef2c codifica el factor de transcripción MEF-2C, un regulador de la familia MADS-box/MEF2 que integra la señalización dependiente de Ca2+ para controlar programas génicos específicos de linaje. MEF-2C coordina redes de cromatina y transcripción implicadas en la miogénesis, la diferenciación neuronal y la remodelación sináptica, el desarrollo de células inmunitarias y la cardiogénesis, mediante interacciones con cofactores como las HDAC de clase IIa y vías sensibles a MAPK/CaMK. En modelos de ratón, la alteración de la dosis o la actividad de Mef2c perturba el patrón del desarrollo y la transcripción dependiente de la actividad, lo que lo hace relevante para estudios de fenotipos del neurodesarrollo, la conducción y el remodelado cardíacos, y la especificación de linajes hematopoyéticos. Su amplio alcance regulador también vincula a MEF-2C con programas de respuesta al estrés y de diferenciación que pueden investigarse en células primarias y en sistemas derivados de células madre.
MEF-2C El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Mef2c en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Mef2c. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Mef2c. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Mef2c alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.