Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) MBNL1: sc-402194-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MBNL1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MBNL1 Double Nickase (h) et le plasmide MBNL1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MBNL1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MBNL1 Antibody (3A4): sc-47740
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MBNL1 | sc-402194-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MBNL1 | sc-402194-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MBNL1 (muscleblind-like splicing regulator 1) code une protéine se liant à l’ARN qui reconnaît des motifs YGCY dans les pré-ARNm afin de contrôler l’épissage alternatif, la localisation des ARNm et leur stabilité. Elle coordonne des programmes de régulation génique post-transcriptionnelle importants pour la myogenèse, la différenciation neuronale et le maintien de l’expression d’isoformes spécifiques des tissus. MBNL1 participe au traitement de l’ARN et à des voies liées au spliceosome, et contribue à établir des transitions d’épissage développementales à travers de nombreux transcrits. La dérégulation ou la séquestration fonctionnelle de MBNL1 est fortement liée à des signatures d’épissage aberrantes observées dans la dystrophie myotonique et d’autres phénotypes neuromusculaires, ce qui en fait un nœud clé pour les études mécanistiques sur les défauts de maturation de l’ARN.
MBNL1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MBNL1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MBNL1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MBNL1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MBNL1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.