Plasmide Double Nickase (h) MBL-C: sc-403131-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MBL-C correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MBL-C Double Nickase (h) et le plasmide MBL-C Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MBL2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MBL-C | sc-403131-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MBL-C | sc-403131-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MBL2 code la lectine liant le mannose (MBL-C), une molécule soluble de reconnaissance de motifs qui déclenche la voie des lectines du complément en se liant à des motifs glucidiques microbiens et en activant les protéases MASP. Par l’opsonisation et l’amplification de la cascade du complément, MBL-C contribue à la surveillance immunitaire innée, à l’élimination du matériel apoptotique et à la modulation du tonus inflammatoire au niveau des sites muqueux et systémiques. Des variations de l’expression de MBL2 ou de sa capacité d’oligomérisation ont été associées à une susceptibilité modifiée aux infections et à des réponses inflammatoires dérégulées, et MBL2 est fréquemment étudié comme modificateur de phénotypes immunitaires dans des contextes de sepsis, de maladies auto-immunes et de maladies inflammatoires chroniques. En tant que composant circulant produit principalement par les hépatocytes, MBL-C constitue également un marqueur facilement exploitable pour étudier les médiateurs immunitaires sécrétés, la dynamique d’activation du complément et les voies d’interaction hôte–pathogène.
MBL-C Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MBL2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MBL2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MBL2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MBL2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.