matrin-3 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-418085-LAC

MATR3 codifica a matrin-3, uma proteína da matriz nuclear com capacidade de ligação a RNA/DNA, implicada na organização da arquitetura nuclear e na regulação de programas de expressão génica por meio do processamento e da estabilização de RNA, bem como do transporte nucleocitoplasmático. A matrin-3 associa-se a complexos ribonucleoproteicos e influencia o splicing de pré‑mRNA e a regulação transcricional, ligando-a a vias que governam a manutenção do genoma e o metabolismo de RNA responsivo ao stress. A desregulação ou mutações em MATR3 têm sido associadas a fenótipos neurodegenerativos, incluindo ELA (esclerose lateral amiotrófica) e miopatia distal, destacando a sua relevância para estudos de homeostase neuronal e da biologia de proteínas ligantes de RNA. Como um fator nuclear amplamente expresso, a matrin-3 é frequentemente investigada no contexto de proteostase, de assemblies de RNP separados por fase e da vulnerabilidade específica de certos tipos celulares a defeitos no processamento de RNA.

As Partículas de Ativação Lentivirais matrin-3 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de MATR3 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais matrin-3 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição MATR3, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de matrin-3. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo MATR3 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.