MATH-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419231
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- MATH-2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico MATH-2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MATH-2 Anticuerpo (3G7): sc-517009
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
MATH-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419231 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Neurod6 codifica el factor de transcripción de tipo hélice-bucle-hélice básico (bHLH) MATH-2, un regulador clave de la diferenciación, maduración y supervivencia neuronal en el sistema nervioso en desarrollo del ratón. MATH-2 influye en programas génicos que favorecen el crecimiento de neuritas, la guía axonal y el mantenimiento de la identidad neuronal glutamatérgica, coordinándose con otros factores proneurales bHLH para conformar los circuitos corticales e hipocampales. Mediante el control transcripcional del destino neuronal y la conectividad, Neurod6 es relevante para estudios sobre mecanismos del neurodesarrollo y vías implicadas en fenotipos cognitivos y conductuales. Las redes de diferenciación impulsadas por bHLH desreguladas se examinan con frecuencia en modelos de trastornos del neurodesarrollo y de vulnerabilidad neuronal.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO MATH-2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Neurod6 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Neurod6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Neurod6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MATH-2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Neurod6 para la investigación de la señalización de MATH-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Neurod6 críticos para la función de MATH-2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Neurod6 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido MATH-2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido MATH-2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Neurod6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MATH-2 (m) y el plásmido HDR MATH-2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Neurod6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Neurod6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.