Partículas Lentivirales de Activación (h) Maspin: sc-416693-LAC

El SERPINB5 humano codifica maspina, un miembro no inhibidor de la familia de las serpinas con actividades supresoras de tumores dependientes del contexto que influyen en la diferenciación epitelial, la adhesión celular y la motilidad. La maspina se ha vinculado con la regulación de la remodelación de la matriz extracelular y la señalización asociada a proteasas, con efectos descritos sobre la dinámica de las adhesiones focales y las respuestas celulares al estrés. Los cambios en la expresión y la localización subcelular de SERPINB5 se han asociado con la progresión y el potencial metastásico en múltiples carcinomas, lo que lo convierte en un marcador útil para estudiar la plasticidad epitelio-mesenquimal. En modelos de cáncer de mama, próstata y páncreas, la modulación de maspina se ha utilizado para investigar vías que gobiernan la invasión, programas relacionados con la angiogénesis y el control transcripcional del estado de linaje.

Las partículas de activación lentiviral Maspin (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de SERPINB5 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Maspin (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción SERPINB5, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Maspin. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo SERPINB5 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.