MALT1 CRISPR Activationプラスミド (h): sc-400791-ACT

ヒトMALT1（mucosa-associated lymphoid tissue lymphoma translocation protein 1：粘膜関連リンパ組織リンパ腫転座タンパク質1）はパラカスパーゼであり、リンパ球における抗原受容体下流の中心的なシグナル伝達ハブとして機能する。CARD11–BCL10–MALT1（CBM）複合体からのシグナルを統合し、カノニカルNF-κBおよびMAPK経路の活性化を駆動する。足場（スキャフォールド）としての役割に加えて、MALT1プロテアーゼは選択的な基質を切断し、T細胞およびB細胞の活性化、サイトカイン産生、ならびに生存プログラムを調整する。MALT1シグナルの破綻は異常な免疫活性化と関連し、NF-κB依存的な転写プログラムの変化を介してリンパ系悪性腫瘍の生物学にも関与すると考えられている。そのため、MALT1発現の制御は、シグナル依存的転写の解析、免疫受容体経路の配線（ネットワーク）解明、そして状況依存的な炎症性遺伝子制御の研究に有用である。

MALT1 CRISPR活性化プラスミド（h）は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性MALT1の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。

MALT1 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における MALT1 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異（D10AおよびN863A）を有する、触媒活性のないCas9（dCas9）を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。

標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はMALT1転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性MALT1の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のMALT1遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるMALT1依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびMALT1発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるMALT1経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。