Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (h) Mad 1: sc-401812-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Mad 1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Mad 1 (h) y el plásmido de doble nickasa Mad 1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MXD1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Mad 1 Anticuerpo (F-1): sc-8012
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Mad 1 | sc-401812-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Mad 1 | sc-401812-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MXD1 codifica Mad1, un factor de transcripción básico hélice-bucle-hélice con cremallera de leucina que forma heterodímeros con MAX para unirse a elementos E-box y reprimir la transcripción impulsada por MYC. Mediante el reclutamiento de complejos correpresores SIN3/HDAC, Mad1 promueve programas de silenciamiento transcripcional vinculados al control del ciclo celular, la diferenciación y la apoptosis, contrarrestando la actividad proliferativa de MYC–MAX. La regulación alterada de la red MXD1–MYC se ha asociado con señales de crecimiento desreguladas y defectos en el compromiso de linaje observados en múltiples contextos de cáncer, lo que convierte a MXD1 en un nodo útil para analizar los circuitos transcripcionales oncogénicos. La función de Mad1 también es relevante para estudios de remodelación de la cromatina y represión transcripcional dependiente de señales.
Mad 1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MXD1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MXD1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MXD1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MXD1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.