LZTR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404531

概要

LZTR1（leucine zipper–like transcription regulator 1）は、主にゴルジ体に局在するBTB-Kelchファミリータンパク質をコードしており、CUL3を基盤とするE3ユビキチンリガーゼ複合体の基質アダプターとして機能します。ユビキチン依存的なタンパク質安定性の制御を介して、LZTR1はRASファミリーGTPアーゼおよび関連するシグナル伝達因子の分解回転と空間的配置を調節し、RAS/MAPK経路シグナルを制御します。本遺伝子はシグナル伝達、プロテオスタシス、小胞輸送などの細胞プロセスに関与し、その下流で増殖および分化プログラムに影響を及ぼします。LZTR1の遺伝学的変化は、RASopathy関連の表現型や腫瘍感受性の文脈と関連づけられており、異常なRASシグナルの機序研究における重要性を支持しています。

LZTR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるLZTR1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、LZTR1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、LZTR1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LZTR1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LZTR1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、LZTR1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LZTR1の機能に不可欠なLZTR1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、LZTR1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LZTR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびLZTR1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、LZTR1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LZTR1 HDRプラスミド（h）および LZTR1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLZTR1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLZTR1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。