Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
LZTFL1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-430035
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- LZTFL1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico LZTFL1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: LZTFL1 Anticuerpo (C-6): sc-376022
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
LZTFL1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-430035 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Lztfl1 codifica LZTFL1, una proteína citosólica implicada en la regulación de la estructura y el transporte (tráfico) del cilio primario, lo que influye en la señalización compartimentalizada en la membrana ciliar. Se ha relacionado con la modulación de vías dependientes de los cilios, como la señalización Hedgehog, y con programas más amplios de polaridad y diferenciación de las células epiteliales. La alteración de la expresión o la función de LZTFL1 se ha asociado con cambios en los fenotipos de migración e invasión celular, lo que respalda su relevancia para la biología del cáncer y la homeostasis tisular. En modelos murinos, Lztfl1 se utiliza para investigar cómo la señalización ciliar y la organización epitelial moldean procesos del desarrollo y asociados a enfermedades.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO LZTFL1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Lztfl1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Lztfl1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Lztfl1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LZTFL1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Lztfl1 para la investigación de la señalización de LZTFL1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Lztfl1 críticos para la función de LZTFL1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Lztfl1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido LZTFL1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido LZTFL1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Lztfl1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LZTFL1 (m) y el plásmido HDR LZTFL1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Lztfl1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Lztfl1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.