LXR beta/NER/NR1H2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-423617

Übersicht

Nr1h2 kodiert den Liver-X-Rezeptor Beta (LXRβ/NER), einen ligandenaktivierten nukleären Rezeptor, der als Transkriptionsregulator der Lipid- und Cholesterinhomöostase fungiert. In Mauszellen bildet LXRβ Heterodimere mit RXR, um Gene zu modulieren, die den reversen Cholesterintransport, den Fettsäurestoffwechsel und entzündungsbezogene Genprogramme steuern, und verknüpft dabei metabolische Signale mit der angeborenen Immunantwort. Dieser Signalweg überschneidet sich mit der Polarisation von Makrophagen, der Biologie von Adipozyten und neuroinflammatorischen Reaktionen und verbindet die Nr1h2-Aktivität in experimentellen Modellen mit Mechanismen, die für Atherosklerose, metabolische Dysfunktion und entzündliche ZNS-Phänotypen relevant sind. Da LXRβ Transkriptionsnetzwerke in mehreren Geweben beeinflusst, wird die Perturbation von Nr1h2 häufig genutzt, um das Crosstalk nukleärer Rezeptoren und die ligandenabhängige Genregulation zu untersuchen.

Das LXR beta/NER/NR1H2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Nr1h2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Nr1h2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Nr1h2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die LXR beta/NER/NR1H2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Nr1h2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der LXR beta/NER/NR1H2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Nr1h2-Exone abzielen, die für die LXR beta/NER/NR1H2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Nr1h2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom LXR beta/NER/NR1H2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom LXR beta/NER/NR1H2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Nr1h2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das LXR beta/NER/NR1H2 HDR-Plasmid (m) und LXR beta/NER/NR1H2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Nr1h2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Nr1h2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.