LTBP-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402289

Descripción general

LTBP1 codifica la proteína 1 de unión al factor de crecimiento transformante beta latente (LTBP-1), una glicoproteína de la matriz extracelular que se une al complejo latente de TGF-β y regula su secuestro, activación y presentación espacial a las células. Al controlar la biodisponibilidad de TGF-β, LTBP-1 influye en la señalización dependiente de SMAD y en programas posteriores de remodelación de la matriz, transición epitelio-mesenquimal, adhesión celular y homeostasis tisular. La función de LTBP1 está estrechamente vinculada a la organización de las microfibrillas de fibrilina y a la activación de TGF-β regulada mecánicamente, conectando la arquitectura de la matriz extracelular con la señalización por citocinas. La actividad desregulada del eje LTBP1/TGF-β se ha implicado en la remodelación asociada a la fibrosis, la señalización estromal asociada al cáncer y la patobiología vascular y del tejido conectivo, lo que lo hace relevante para estudios mecanísticos de fenotipos impulsados por el microambiente.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO LTBP-1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen LTBP1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del LTBP1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de LTBP1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LTBP-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en LTBP1 para la investigación de la señalización de LTBP-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de LTBP1 críticos para la función de LTBP-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de LTBP1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido LTBP-1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido LTBP-1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus LTBP1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LTBP-1 (h) y el plásmido HDR LTBP-1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología LTBP1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana LTBP1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.