Plásmido Doble Nickase (h) LSm11: sc-406646-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)LSm11 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa LSm11 (h) y el plásmido de doble nickasa LSm11 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a LSM11. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) LSm11 | sc-406646-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) LSm11 | sc-406646-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LSM11 codifica LSm11, una proteína de unión a ARN tipo Sm que forma parte de la ribonucleoproteína nuclear pequeña U7 (U7 snRNP), especializada en el procesamiento del extremo 3′ de los pre-ARNm de histonas dependientes de la replicación. Mediante interacciones con el snRNA U7 y factores asociados como el eje FLASH/NPAT, LSm11 sostiene la expresión de genes de histonas ligada a la fase S, el ensamblaje de la cromatina y la estabilidad del genoma durante la progresión del ciclo celular. La alteración de esta vía puede perturbar el suministro de histonas, la temporización de la replicación y las respuestas al daño del ADN, procesos que se examinan con frecuencia en contextos de estrés proliferativo y oncogénicos. Por ello, LSm11 es relevante para estudios mecanísticos de la regulación del ciclo celular acoplada al procesamiento de ARN y de las consecuencias del procesamiento incorrecto del ARNm de histonas.
LSm11 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus LSM11 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de LSM11. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de LSM11. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con LSM11 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.