LSm11 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406646-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LSm11O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LSm11 (h) e o Plasmídeo Double Nickase LSm11 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LSM11. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LSm11 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406646-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LSm11 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406646-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LSM11 codifica a LSm11, uma proteína de ligação a RNA do tipo Sm que integra a pequena ribonucleoproteína nuclear U7 (U7 snRNP), especializada no processamento da extremidade 3′ dos pré-mRNAs de histonas dependentes de replicação. Por meio de interações com o U7 snRNA e fatores associados, como o eixo FLASH/NPAT, a LSm11 sustenta a expressão de genes de histonas ligada à fase S, a montagem da cromatina e a estabilidade do genoma durante a progressão do ciclo celular. A disrupção dessa via pode desregular o suprimento de histonas, o timing de replicação e as respostas a dano no DNA, processos frequentemente investigados em contextos de estresse proliferativo e oncogênese. Assim, a LSm11 é relevante para estudos mecanísticos da regulação do ciclo celular acoplada ao processamento de RNA e das consequências do processamento incorreto do mRNA de histonas.
LSm11 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LSM11 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LSM11. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LSM11. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LSM11 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.